大肠杆菌核糖核酸酶 H (RNase H) 是一种核酸内切酶，可特异性降解 DNA-RNA 杂交体的 RNA，而不影响 DNA 或未杂交的 RNA。这种高度纯化的制剂适用于 RNA 扩增反应。该酶制剂在含有 1.0 M 海藻糖的储存缓冲液中制备。 请咨询定制浓度和批量。 应用： 通过去除 RNA 来合成第二链 cDNA 与 AMV RT 和 T7 RNA 聚合酶一起用于 RNA 扩增 单位定义： 一个单位的 RNaseH 是在 37oC 下使用以下反应条件在 20 分钟内催化产生 1 nmol 酸溶性核苷酸的酶量： 40 mM TrisHCl，pH 7.5 1.0 μM [3H]-聚 (rA):24 μM 聚 (dT) 4.0 毫米氯化镁 1.0 毫米 DTT 30 μg/mL BSA 4.0% 甘油 RNaseH 在甘油中的储存缓冲条件： 20:0 mM TrisHCl，pH 7.5 300 毫米氯化钾 20.0 毫米醋酸镁 7.0 毫米乙二胺四乙酸 1.0 mM 二硫苏糖醇 50% 甘油 0.2% 海卫 X100 海藻糖中 RNaseH 的储存缓冲液条件。与上述相同，除了 1.0 M 海藻糖而不是甘油。 质量控制： DNA酶活性： 将半微克 Phi X-174 DNA 的 Hae 片段与 2.5 单位的 RNase H 在 37oC 下孵育 3 小时，然后在天然琼脂糖凝胶中进行电泳，同时进行对照阳性 DNase 1 反应。检测到的 DNA 酶 1 不超过 2.5 X 10 E-4 单位的当量。 核糖核酸酶活性： 将 1 微克 RNA Ladder 在 37oC 下与 4.0 单位的 RNase H 孵育 2 小时，然后在天然琼脂糖凝胶中进行电泳，同时进行对照阳性 RNase 1A 反应。检测到的 RNase 1A 不超过 8 X 10-8 单位的当量。 具体活性： E.coli RNase H的比活性不低于300,000单位/mg。 参考： Sambrook, J.、Fritsch, E. F. 和 Maniatis, T. (1989) 分子克隆：实验室手册，（第 2 版），8.64 – 8.65